本発明は、前駆細胞の生存率を改善する（前駆細胞の凍結保存を改善することを含む）ための、前駆細胞と組み合わせた多硫酸化多糖類の使用に関し、新規の組成物、方法および使用を提供する。また本発明は、前駆細胞の増殖および分化を調節するための多硫酸化多糖類の使用にも関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
多硫酸化多糖類またはその生物学的に活性な分子断片と一緒に前駆細胞を含む組成物。
【請求項２】
さらに、キャリア媒体を含む請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記キャリア媒体が、培地、凍結保存培地および／または薬学的に許容可能なキャリアである請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記前駆細胞が、軟骨前駆細胞である請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記前駆細胞が、Ｓｔｒｏ−１^ｂｒｉ細胞、および／またはＳｔｒｏ−１^ｂｒｉ子孫細胞である請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記多硫酸化多糖類が、ペントサン多硫酸、コンドロイチン多硫酸、キトサン多硫酸、デキストラン多硫酸およびヘパリン（高分子量および低分子量）、ならびにこれらの薬学的に許容可能な塩から選択される請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記多硫酸化多糖類が、ペントサン多硫酸、ペントサン多硫酸のナトリウム塩（ＮａＰＰＳ）、ペントサン多硫酸のマグネシウム塩（ＭｇＰＰＳ）、および／またはペントサン多硫酸のカルシウム塩（ＣａＰＰＳ）から選択される請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記組成物が、約１０００〜約１×１０^１０個の細胞、約１×１０^５〜１×１０^９個の細胞、約１００，０００〜約５×１０^８個の細胞、約５００，０００〜約２×１０^８個の細胞、約１×１０^６〜約２×１０^８個の細胞、約１×１０^６〜約１×１０^８個の細胞、約１×１０^６、２×１０^６、３×１０^６、４×１０^６、５×１０^６、６×１０^６、７×１０^６、８×１０^６、９×１０^６、１×１０^７、２×１０^７、３×１０^７、４×１０^７、５×１０^７、６×１０^７、７×１０^７、８×１０^７、９×１０^７、１×１０^８、２×１０^８、３×１０^８、４×１０^８、５×１０^８、６×１０^８、７×１０^８、８×１０^８、または約９×１０^８個の細胞を含む請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物が、約５００ｎｇ／ｍｌ／細胞百万個〜１０ｍｇ／ｍｌ／細胞百万個、５００ｎｇ／ｍｌ／細胞百万個〜２０００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ／ｍｌ／細胞百万個〜１０００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、または１μｇ／ｍｌ／細胞百万個〜５００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、５００ｎｇ〜１０μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜１０μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜８μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜６μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜５μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜３μｇ／ｍｌ／細胞百万個、２μｇ〜６μｇ／ｍｌ／細胞百万個、２．５μｇ〜５μｇ／ｍｌ／細胞百万個、または３μｇ〜５μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜１００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜５０μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜２０μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜１５μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１０μｇ〜１００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、２０μｇ〜１００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、または５０μｇ〜１００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１μｇ〜１０００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１００μｇ〜８００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１００μｇ〜６００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、１００μｇ〜５００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、２００μｇ〜５００μｇ／ｍｌ／細胞百万個、５００ｎｇ、１μｇ、２μｇ、２．５μｇ、５μｇ、１０μｇ、１５μｇ、２０μｇ、３０μｇ、４０μｇ、５０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１５０μｇ、２００μｇ、２５０μｇ、３００μｇ、３５０μｇ、４００μｇ、４５０μｇ、５００μｇ、５５０μｇ、６００μｇ、６５０μｇ、７００μｇ、７５０μｇ、８００μｇ、８５０μｇ、９００μｇ、９５０μｇ、１０００μｇ、１０５０μｇ、１１００μｇ、１１５０μｇ、１２００μｇ、１２５０μｇ、１３００μｇ、１３５０μｇ、１４００μｇ、１４５０μｇ、１５００μｇ、１５５０μｇ、１６００μｇ、１６５０μｇ、１７００μｇ、１７５０μｇ、１８００μｇ、１８５０μｇ、１９００μｇ、１９５０μｇ、または２０００μｇ／ｍｌ／細胞百万個の濃度の多硫酸化多糖類を含む請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、約１×１０^６〜１×１０^８個の前駆細胞および２５〜５０ｍｇの多硫酸化多糖類、１×１０^８個の前駆細胞および２５〜５０ｍｇ／ｍｌの多硫酸化多糖類を含む請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、以下の成分：
− 有機および／または無機塩、
− 緩衝液、
− ＢＳＡまたはトランスフェリンなどのタンパク質、
− インスリン様成長因子、インスリン、線維芽細胞様成長因子、ＢＭＰ−ＴＧＦ−βスーパーファミリー（例えば、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−７、ＢＭＰ−８、ＴＧＦβ）および線維芽細胞成長因子ファミリー、ＩＧＦ、ＦＧＦ、ＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＶＥＧＦを含む成長因子およびサイトカイン、
− ＦＢＳ、新生子牛、他の全ての哺乳類種を含む動物の血清、
− Ｐｒｏｆｒｅｅｚｅ（登録商標）およびＣｒｙｏＳｔｏｒ（登録商標）などの凍結保存剤、
− ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、グリセロール、トレハロース、スクロースおよびその他の糖、またはジメチルアセトアミドを含む凍結保護剤、
− 炭水化物、
− ビタミン／補助因子、
− ホルモン、
− 抗生物質、
− 接着因子、
− アミノ酸、
− デキストランのような血漿増量剤、
− ヒトおよび他の哺乳類種の両方の血漿、
− 代用血漿、
− ヒアルロナンおよび／またはヒアルロン酸（天然または架橋の両方）
のうちの１つ以上をさらに含む請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
ＤＭＳＯが１〜２０％、１〜１５％、５〜１５％、１〜１０％、５％、７．５％、１０％、１５％または２０％の範囲で存在し、そして／あるいは、ＦＢＳが１〜５０％、１〜２０％、１〜１０％、５％、７．５％、１０％、１５％または２０％の範囲で存在する請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記キャリア媒体が、Ｐｒｏｆｒｅｅｚｅ（登録商標）を含む請求項２〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物がさらに、ＮＣ４またはその生物学的に活性な断片を含む請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前駆細胞を多硫酸化多糖類またはその生物学的に活性な分子断片に暴露することを含む、前駆細胞の凍結保存を向上させる方法。
【請求項１６】
多硫酸化多糖類の凍結保存剤としての使用。
【請求項１７】
別の実施形態では、本発明は、前駆細胞の凍結保存を向上させるための請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物の使用を提供する。
【請求項１８】
多硫酸化多糖類またはその生物学的に活性な分子断片を前駆細胞に暴露することを含む、前駆細胞の増殖の調節方法。
【請求項１９】
前駆細胞の増殖を調節するための請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項２０】
多硫酸化多糖類またはその生物学的に活性な分子断片を前駆細胞に暴露することによって、軟骨細胞への分化、骨芽細胞への分化または脂肪細胞への分化を含む前駆細胞の分化を調節する方法。
【請求項２１】
軟骨細胞への分化、骨芽細胞への分化または脂肪細胞への分化を含む前駆細胞の分化を調節するための請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項２２】
添付図面を参照して実質的に上述で定義されたような組成物、方法または使用。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図２０Ｃ】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０Ａ】

【図２０Ｂ】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【公表番号】特表２０１１−５０５１５２（Ｐ２０１１−５０５１５２Ａ）
【公表日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３６２８６（Ｐ２０１０−５３６２８６）
【出願日】平成２０年１２月４日（２００８．１２．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＡＵ２００８／００１７９５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７０８４２
【国際公開日】平成２１年６月１１日（２００９．６．１１）
【出願人】（５１０１５４９１４）プロテオバイオアクティブズ・ピーティーワイ・リミテッド (1)
【Ｆターム（参考）】